Apports des évolutions de la spectrométrie de masse pour l'étude statique et dynamique du métabolisme des lipides et des lipoprotéines / Mikaël Croyal ; sous la direction de Michel Krempf et de Estelle Nobecourt-Dupuy

Date :

Type : Livre / Book

Type : Thèse / Thesis

Langue / Language : français / French

Catalogue Worldcat

Lipides

Isotopes stables

Spectrométrie de masse -- Dissertation universitaire

Lipoprotéines -- Dissertation universitaire

Apolipoprotéines -- Dissertation universitaire

Krempf, Michel (Directeur de thèse / thesis advisor)

Nobecourt-Dupuy, Estelle (1975-....) (Directeur de thèse / thesis advisor)

Bard, Jean-Marie (Président du jury de soutenance / praeses)

Valero, René (1971-....) (Rapporteur de la thèse / thesis reporter)

Tomé, Daniel (Rapporteur de la thèse / thesis reporter)

Boccara, Franck (1967-....) (Membre du jury / opponent)

Le Bizec, Bruno (1967-....) (Membre du jury / opponent)

Robert, Philippe (pharmacien) (Membre du jury / opponent)

Université de Nantes (1962-2021) (Organisme de soutenance / degree-grantor)

École doctorale Biologie-Santé Nantes-Angers (Ecole doctorale associée à la thèse / doctoral school)

Université Bretagne Loire (Autre partenaire associé à la thèse / thesis associated third party)

Physiopathologie des Adaptations Nutritionnelles (Nantes) (Laboratoire associé à la thèse / thesis associated laboratory)

Résumé / Abstract : Les lipides s’associent aux apolipoprotéines pour former les lipoprotéines, nécessaires à leur transport au sein de l’organisme. Nombre de leurs perturbations métaboliques exposent à un risque élevé de maladies cardiovasculaires, et l’évolution de la spectrométrie de masse contribue au développement d’outils diagnostiques précoces de ces dérèglements. La découverte de marqueurs prédictifs des pathologies requiert néanmoins la compréhension fine des mécanismes physiologiques sous-jacents. L’analyse des flux métaboliques par l’utilisation de traceurs isotopiques permet l’accès à ces informations. Ces études demeurent cependant complexes et nécessitent le recours à plusieurs techniques d’analyses longues et coûteuses. L’objectif de ce travail a été de développer des approches originales basées sur la spectrométrie de masse afin d’élargir le champ de ces analyses, statiques comme dynamiques, au métabolisme lipidique. En combinant la protéolyse enzymatique et l’analyse ciblée de peptides signatures, nous avons considérablement simplifié et étendu l’étude des apolipoprotéines jusqu’à accéder simultanément à de nombreuses informations physiologiques telles que leurs concentrations, leurs taux de renouvellement et leurs éventuelles modifications polymorphiques. D’autres outils complémentaires, permettant l’étude ciblée ou non des lipides ainsi que la mesure de leurs enrichissements, ont également été développés afin d’accéder de façon efficace et sensible à leur caractérisation. Les limites de ces méthodes ont été explorées avant d’être appliquées à des études de cas concrets, portant sur des dyslipidémies ou l’efficacité de traitements hypolipémiants.

Résumé / Abstract : Lipids bind to apolipoproteins to form lipoproteins, having in charge their transport into the circulation. Numerous metabolic disturbances of lipids expose to an increased risk of cardiovascular diseases. The last advances in mass spectrometry have recently helped to develop usefull tools for early diagnosis of these disorders. Nevertheless, the accurate characterization of predictive markers requires to decipher the physiological mechanisms involved in threir metabolism. Metabolic flux analyses with stable isotope labeled tracers can give such information. However, these studies remain complex, time-consuming and require the use of several technical processes. Therefore, we aimed to develop original mass spectrometry-based approaches to improve this kind of analyses. We have used enzymatic proteolysis and targeted analysis of specific peptides for the study of a large range of apolipoproteins. We were able to get simultaneaoulsy several physiological information such as their concentrations, kinetics and putative polymorphisms. Additional reliable tools, including both targeted and non-targeted lipid analyses as well as their enrichment measurements, have also been developed to improve our level of knowledge. The limitations of these methods were explored before to be applied to specific case studies, such as dyslipidemias (diabetes, hypertriglyceridemia, obesity) or efficacy of lipid-lowering treatments.