Date : 2014
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Langue / Language : anglais / English
Cellules de la moelle osseuse -- Imagerie
Sang -- Maladies -- Diagnostic
Classification Dewey : 615.1
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Résumé / Abstract : L’analyse de la moelle osseuse par cytométrie en flux (CMF) fait partie du diagnostic de routine des hémopathies dans un laboratoire d’analyses médicales. La formule leucocytaire et la recherche de populations anormales sont habituellement réalisées au préalable grâce à l’analyse morphologique microscopique sur frottis par un cytologiste averti. Nous proposons ici une combinaison de 8 couleurs en un seul tube, CD3-FITC/ CD10-PE/ CD38-PerCP-Cy5.5/ CD19-PECy7/ CD36-APC/ CD16-APC-H7/ CD34-BV421/ CD45-V500, visant à obtenir ces données grâce à la CMF. Nous avons inclus 99 moelle osseuses, classés en 2 groupes, i) 51 échantillons normaux, provenant de donneurs sains ou de patients avec diverses pathologies et ii) 48 échantillons pathologiques avec des anomalies quantitatives ou qualitatives. L’analyse a été réalisée sur un FACSCanto-II. Dans ce travail, nous proposons une stratégie standardisée d’identification de 14 sous-populations normales, myéloïdes et lymphoïdes. Nous avons validé cette approche de CMF en corrélant les résultats avec ceux de l’analyse morphologique, pour des cellules normales comme pathologiques. Nous montrons que cette approche d’identification et de numération cellulaire est facilement réalisable et très reproductible. Nous proposons aussi une série de critères permettant de détecter les moelles pathologiques et d’orienter vers un panel complémentaire approprié pour l’identification des cellules anormales. En conclusion, cette approche déterminant la composition cellulaire de la moelle osseuse par CMF avec une combinaison 8 couleurs est particulièrement intéressante en raison de sa précision, simplicité, rapidité, et reproductibilité.
Résumé / Abstract : Bone marrow analysis by flow cytometry is part of the routine diagnosis of haematological disorders in medical laboratories. Leukocyte differential and search for abnormal subsets is yet usually performed previously through morphological examination on glass smears by skilled microscopists. In the present work we propose a single 8-color tube i.e. CD3-FITC/ CD10-PE/ CD38-PerCP-Cy5.5/ CD19-PECy7/ CD36-APC/ CD16-APC-H7/ CD34-BV421/ CD45-V500, aiming at equivalent information using flow cytometry. Ninety nine bone marrow samples have been included and classified in 2 groups, i) 51 normal samples from healthy donors or patients suffering from different diseases at diagnosis or during remission, and ii) 48 pathological samples involving quantitative and/or qualitative abnormalities. Analysis has been performed using a FACSCanto-II cytometer. We first proposed a standardized strategy of sequential regions leading to identification of 14-part normal leukocyte differential within lymphoid and myeloid lineages. We validated this approach by flow cytometry against microscopic morphological examination, in case of normal as well as tumour cells. Very interestingly, we showed that cell identification and numeration by flow cytometry was very easily performed and highly reproducible. Finally, we proposed criteria indicative of pathological conditions and orienting further analysis for the identification of abnormal cells. In conclusion, the present flow cytometric approach using a combination of 8 antibodies proved to be very simple, rapid, and reproducible for the determination of the bone marrow cell composition with high precision.