Date : 2011
Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 2011
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Cancer -- Caractère envahissant
Résumé / Abstract : Les gioblastomes multiformes (GBM) sont des tumeurs malignes hautement invasives et angiogéniques avec une médiane de survie n’excédant pas 15 mois. De précédents travaux ont révélé une surexpression importante de l’ARN messager de la fibronectine (FN) dans les GBMs, bien que le marquage immunohistochimique des variants cellulaires de la protéine (FN-EDB/FN-EDA) soit, dans ces tumeurs, typiquement associé à la vasculature angiogénique. Au cours de ma thèse, nous avons examiné l’expression de la FN par les cellules tumorales et analysé sa possible implication dans le phénotype invasif des GBMs. Nous avons montré que plusieurs variants de la FN issus de l’épissage alternatif (FN-EDB/FN-EDA et la région IIICS) sont exprimés et assemblés en fibres à la surface cellulaire par différentes lignées de GBMs humains. Nous avons concentré nos recherches sur la lignée U-87 qui forme spontanément dans des cultures en deux dimensions de denses réseaux cellulaires et des dômes similaires à des sphéroïdes. La perte d’expression des variants de la FN par des shRNAs perturbe l’assemblage matriciel et l’organisation en réseaux multicellulaires exerçant d’importants effets sur l’adhésion cellulaire et la motilité. Bien que la perte d’expression de la FN augmente la persistance de la migration directionnelle des cellules isolées, elle compromet l’invasion collective à partir de sphéroïdes de gliomes à travers une matrice riche en laminine (Matrigel), sensibilise les cellules à des radiations ionisantes et diminue de façon significative la croissance tumorale et l’angiogenèse in vivo quand les sphéroïdes sont injectés dans le cortex cérébral de souris nude. Par ailleurs, la perte d’expression de la FN perturbe la signalisation du TGF-β (transforming grownth factor) qui est également surexprimé dans les GBMs où il joue un rôle majeur dans le développement d’un phénotype agressif. Nos résultats montrent que la FN produite par la tumeur, et pas seulement par les cellules du parenchyme sain ou la composante vasculaire angiogénique, joue un rôle dans la physiopathologie des GBMs. Ce travail de thèse fournit de nouvelles connaissances quant aux implications que pourrait avoir le ciblage de la fibronectine et/ou de ses interactions dans le combat de ce fléau.
Résumé / Abstract : Glioblastoma multiforme (GBM) are highly invasive and angiogenic malignancies with a median survival time from diagnosis of less than 15 months. Previous work has revealed robust overexpression of fibronectine (FN) mRNA in GBM, although immunohistochemical staining of cellular FN variants (FN-EDB/FN-EDA) in these tumors is typically associated with the angiogenic vasculature. During my thesis, we sought to examine the expression of FN by tumor cells and address its possible involvement in the invasive phenotype of GBM. We show that multiple FN splice variants (FN-EDB/FN-EDA and IIICS regions) are expressed and assembled into fibrillar arrays by several human GBM cell lines in culture. We focused our work on U-87 cell line. Those cells spontaneously form dense cellular networks and spheroid-like domes in two-dimensional culture. Depletion of FN variants by targeted-shRNA expression disrupts matrix assembly and multicellular network organization by exerting profound effects on celle adhesion and motility. Whereras FN depletion enhances persistent directional migration of single cells, it compromises collective invasion of glioma spheroids through a laminin-rich matrix (Matrigel), it sensitizes cells to ionizing radiation and it significantly reduces tumor growth in vivo when spheroids are injected into the cortex of nude mice. Furthermore, FN silencing disrupts TGF- β (transforming grownth factor) signalling which is overexpressedin GBMs, where it plays a major role in the development of tumor agressivity. Our findings show that FN produced by the tumor, and not only the invaded brain or endothelium, plays a role in GBM pathobiology and they provide insights into the implications that targeting FN interactions mays have for comabing this dreaded disease.