Etude structurale et fonctionnelle de FHL2 : un adaptateur pour le complexe de signalisation des intégrines / Haquima El Mourabit ; sous la dir. de Monique Aumailley

Date :

Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 2003

Type : Livre / Book

Type : Thèse / Thesis

Langue / Language : français / French

Catalogue Worldcat

Baculoviridés

Protéomique

Cytosquelette

Spectroscopie de masse

Chromatographie d'affinité

Intégrines

Aumailley, Monique (19..-....) (Directeur de thèse / thesis advisor)

Université Claude Bernard (Lyon) (Organisme de soutenance / degree-grantor)

Résumé / Abstract : FHL2 (Four and a Half LIM domain protein 2) appartient à une famille émergeante de protéines contenant des domaines LIM. Nous avons produit deux protéines recombinantes par le système baculovirus/Cellules dínsecte. Les protéines recombinantes ainsi que la protéine naturelle ont été caractérisées par SDS-PAGE et par spectrométrie de masse MALDI-TOF. La masse moléculaire mesurée de la protéine naturelle FHL2 est de 32742 Da et celle calculée de 32192 Da. Cependant, sa masse moléculaire apparente en SDS-PAGE est de 41 kDa, indiquant que la protéine naturelle a un comportement électrophorétique anormal, probablement dûe à des modifications post-traductionnelles. Au niveau cellulaire, FHL2 est présente à la fois dans le noyau et au niveau des lamellipodes. Pour tester son rôle dans la formation de complexes multi-moléculaires, la protéine recombinante a été utilisée pour isoler des partenaires dínteraction par chromatographie dáffinité. Ces derniers ont été identifiés par leur empreinte peptidique massique par spectrométrie de masse MALDI-TOF. Des protéines associées au cytosquelette sont présentes parmi les protéines retenues elles co-localisent avec FHL2 dans les lamellipodes en immunofluorescence indirecte. Ces résultats suggèrent fortement que FHL2 agirait comme un adaptateur spécifique impliqué dans la formation des adhésions cellulaires naissantes dans les structures dynamiques de la membrane plasmique.