PROPRIETES PHYSICO-CHIMIQUES ET MECANISME REACTIONNEL DE L'ATPASE POMPE A PROTONS DU TONOPLASTE D'ACER PSEUDOPLATANUS / THIERRY MAGNIN ; SOUS LA DIRECTION DE ALAIN PUGIN

Date :

Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 1993

Format : 112 P.

Type : Livre / Book

Type : Thèse / Thesis

Langue / Language : français / French

Pugin, Alain (Directeur de thèse / thesis advisor)

Université de Franche-Comté (1971-....) (Organisme de soutenance / degree-grantor)

Relation : PROPRIETES PHYSICO-CHIMIQUES ET MECANISME REACTIONNEL DE L'ATPASE POMPE A PROTONS DU TONOPLASTE D'ACER PSEUDOPLATANUS / Thierry Magnin ; sous la direction de Alain Pugin / Grenoble : Atelier national de reproduction des thèses , 1993

Résumé / Abstract : LA MEMBRANE VACUOLAIRE, OU TONOPLASTE, DES CELLULES ISOLEES D'ACER PSEUDOPLATANUS RENFERME UNE ATPASE POMPE A PROTONS SENSIBLE AU VANADATE, COMPOSE CONSIDERE COMME UN INHIBITEUR DES ATPASES DE TYPE P FONCTIONNANT AVEC UN INTERMEDIAIRE PHOSPHORYLE. CETTE OBSERVATION SUGGERAIT QUE L'ATPASE DU TONOPLASTE D'ACER PSEUDOPLATANUS ETAIT SOIT UNE ATPASE DE TYPE P, SOIT UNE ATPASE DE TYPE V AVEC UN MECANISME CATALYTIQUE FAISANT INTERVENIR UN INTERMEDIAIRE PHOSPHORYLE. L'ATPASE DU TONOPLASTE D'ACER PSEUDOPLATANUS A ETE PURIFIEE APRES SOLUBILISATION PAR LE TRITON X-100 PAR: 1) CHROMATOGRAPHIE EN GEL FILTRATION PUIS CHROMATOGRAPHIE D'ECHANGES D'IONS; 2) UNE METHODE D'ELECTROPHORESE EN CONDITIONS NON DENATURANTES QUE NOUS AVONS MIS AU POINT. CES DEUX PREPARATIONS D'ENZYME PURIFIEE PRESENTENT DES PROPRIETES ENZYMATIQUES IDENTIQUES A CELLES DE L'ENZYME MEMBRANAIRE. LA MASSE MOLECULAIRE DE L'ATPASE FONCTIONNELLE, DETERMINEE PAR IRRADIATION-INACTIVATION EST DE L'ORDRE DE 400 KDA; ELLE EST COMPOSEE D'AU MOINS 7 SOUS-UNITES. CES RESULTATS COMBINES A DES ETUDES IMMUNOLOGIQUES INDIQUENT QUE L'ATPASE DU TONOPLASTE D'ACER PSEUDOPLATANUS PRESENTE DES CARACTERISTIQUES PHYSICO-CHIMIQUES ANALOGUES A CELLES DES AUTRES ATPASES VACUOLAIRES CONNUES ET QU'ELLE DOIT ETRE CLASSEE PARMI LES V-ATPASES. L'ENZYME PURIFIEE EST RAPIDEMENT PHOSPHORYLEE PAR G-#3#2P ATP, LE MARQUAGE CONCERNANT UNIQUEMENT LE POLYPEPTIDE CATALYTIQUE DE 66 KDA. UNE BREVE CHASSE PAR L'ATP FROID ELIMINE TOUT MARQUAGE ET TRADUIT UN TURNOVER RAPIDE CARACTERISTIQUE D'UN INTERMEDIAIRE PHOSPHORYLE. LA SENSIBILITE DE L'INTERMEDIAIRE PHOSPHORYLE A L'HYDROXYLAMINE ET A DES PH ALCALINS INDIQUE QUE LA LIAISON EST DE TYPE ACYLPHOSPHATE COMME POUR LES P-ATPASES. NOS RESULTATS MONTRENT DONC QUE L'ATPASE DU TONOPLASTE D'ACER PSEUDOPLATANUS EST UNE ATPASE DE TYPE V AVEC UN MECANISME REACTIONNEL CARACTERISTIQUE DES ATPASES DE TYPE P