Caractérisation moléculaire d'une hydrogénase à fer NADP+ dépendante de la bactérie sulfato-réductrice : Désulfovibrio fructosovorans / Souria Malki ; sous la direction de Zorah Dermoun

Date :

Editeur / Publisher : Marseille : [s.n.] , 1995

Type : Livre / Book

Type : Thèse / Thesis

Langue / Language : français / French

Génétique

Sulfobactéries

Hydrogénases

Dermoun, Zorah (1954-....) (Directeur de thèse / thesis advisor)

Université de Provence (1970-2011) (Organisme de soutenance / degree-grantor)

Relation : Caractérisation moléculaire d'une hydrogénase à fer NADP+ dépendante de la bactérie sulfato-réductrice : Désulfovibrio fructosovorans / Souria Malki ; sous la direction de Zorah Dermoun / Grenoble : Atelier national de reproduction des thèses , 1995

Résumé / Abstract : UN FRAGMENT D'ADN GENOMIQUE DE DESULFOVIBRIO FRUCTOSOVORANS AYANT MONTRE UNE FORTE HYBRIDATION AVEC LES GENES HYDAB DE L'HYDROGENASE A FER DE DESULFOVIBRIO VULGARIS HILDENBOROUGH, IL A ETE CLONE ET SEQUENCE. CE FRAGMENT CONTIENT QUATRE GENES QUI ONT ETE APPELES HNDA, B, C ET D. L'OPERON NOUVELLEMENT IDENTIFIE POURRAIT CODER POUR UNE NOUVELLE ESPECE MOLECULAIRE D'HYDROGENASE NAD(P)-REDUCTASE DANS LAQUELLE HNDA ET HNDC FORMERAIENT UNE UNITE FONCTIONNELLE POSSEDANT UNE ACTIVITE NAD(P)-REDUCTASE, ET HNDD CORRESPONDRAIT A UNE SECONDE UNITE FONCTIONNELLE POSSEDANT UNE ACTIVITE HYDROGENASE. HNDB N'ETANT HOMOLOGUE A AUCUNE PROTEINE DE SEQUENCE CONNUE, SON ROLE HYPOTHETIQUE RESTE A ETABLIR. LES EXTRAITS SOLUBLES DE D. FRUCTOSOVORANS NE MONTRENT PAS DE REDUCTION DU NAD DEPENDANTE DE L'HYDROGENE, EN REVANCHE UNE REDUCTION DU NADP DEPENDANTE DE L'HYDROGENE A CLAIREMENT ETE MISE EN EVIDENCE. CETTE ACTIVITE EST TOTALEMENT ABSENTE CHEZ LES MUTANTS PRESENTANT UNE DELETION SUR L'OPERON HND. CE RESULTAT INDIQUE QUE L'OPERON HND CODE REELLEMENT POUR UNE HYDROGENASE NADP-REDUCTASE CHEZ D. FRUCTOSOVORANS. UN PROGRAMME DE MUTAGENESE PAR ECHANGE DE MARQUEUR A ETE ENTREPRIS SUR L'HYDROGENASE NADP-REDUCTASE CHEZ LA SOUCHE SAUVAGE ET LA SOUCHE MR400 DELETEE DES GENES DE STRUCTURE DE L'HYDROGENASE A NICKEL (ROUSSET ET COLL., 1991). L'ETUDE DE L'ENERGETIQUE DES DIFFERENTES SOUCHES DE D. FRUCTOSOVORANS CULTIVEES SUR FRUCTOSE, PYRUVATE ET LACTATE EN PRESENCE DE SULFATE A ETE REALISEE. ELLE MONTRE QUE LA DELETION DE L'HYDROGENASE A NICKEL N'ENTRAINE AUCUN CHANGEMENT DANS LE COMPORTEMENT PHYSIOLOGIQUE DE D. FRUCTOSOVORANS, ALORS QUE CELLE DE L'HYDROGENASE NADP#+-REDUCTASE CONDUIT A UNE DIMINUTION DU TAUX DE CROISSANCE. LES SOUCHES DEPOURVUES A LA FOIS DE L'HYDROGENASE A NICKEL ET DE L'HYDROGENASE NADP#+-REDUCTASE, PRESENTENT UN RENDEMENT DE CROISSANCE QUI EST NETTEMENT PLUS FAIBLE QUE CELUI DU SAUVAGE OU DES SIMPLES MUTANTS. LA PERTE DES DEUX HYDROGENASES SEMBLE CONDUIRE A L'ALTERATION DE LA PHOSPHORYLATION LORS DU METABOLISME DU FRUCTOSE, DU LACTATE ET DU PYRUVATE