Implication des cellules progénitrices dans la prévention du rejet vasculaire sur in modèle murin de greffe aortique / Nicolas Roux ; sous la direction de Didier Plissonnier

Date :

Type : Livre / Book

Type : Thèse / Thesis

Langue / Language : français / French

Rejet de greffe -- Prévention

Modèles animaux

Progéniteurs endothéliaux circulants

Plissonnier, Didier (1961-....) (Directeur de thèse / thesis advisor)

Dureuil, Bertrand (1954-.... ; Médecin) (Membre du jury / opponent)

Fadel, Elie (19..-....) (Membre du jury / opponent)

Gouëffic, Yann (1970-) (Membre du jury / opponent)

Université de Rouen Normandie (1966-....) (Organisme de soutenance / degree-grantor)

École doctorale Normande de biologie intégrative, santé, environnement (Mont-Saint-Aignan, Seine-Maritime) (Ecole doctorale associée à la thèse / doctoral school)

Résumé / Abstract : Le rejet vasculaire après transplantation d'organes est caractérisé par une lésion vasculaire occlusive, conséquence d'une prolifération intimale, en réponse à l'agression d'origine immunologique de la paroi artérielle. Nous pensons qu'une réparation endothéliale précoce pourrait prévenir le rejet vasculaire du greffon. Nous avons étudié différents traitements pharmacologiques mobilisateurs de cellules souches endothéliales, et comparé leur efficacité contre le rejet vasculaire. Des allogreffes aortiques de souris balb/c donneuses ont été réalisées chez des souris receveuses C57B116. Trois traitements ont été utilisés : Fucane de bas poids moléculaire (LMWF), Simvastatine et AMD3100. Les taux de cellules progénitrices circulantes été augmentés par les trois traitements (étude en cytométrie de flux). Nous avons mis en évidence, par étude morphométriques et immuno-histo-chimiques, une diminution significative de la prolifération intimale, comparé aux allogreffes non traitées. Ceci était associé à une ré-endothélialisation des greffons. De plus, sur des souris. chimériques greffées de moelle marquée à la GFP, des cellules GFP+ ont été trouvées au niveau de l'intima des vaisseaux des allogreffes. Ceci indiquait le rôle du recrutement de cellules provenant de la moelle osseuse, probablement progénitrices. endothéliales. La mobilisation de cellules progénitrices d'origine médullaire par ces trois traitements a probablement un rôle direct dans la réparation endothéliale et dans la réduction de la prolifération intimale. Pour réaliser une thérapie cellulaire directe, il était nécessairé de préciser des dates d'injection de cellules progénitrices. Nous avons étudié la cinétique de trois cytokines (SDF-1, MCP-1, VEGF) connues pour être impliquées dans la mobilisation, le recrutement, et la différenciation des cellules progénitrices pendant l'agression vasculaire. Le même modèle a été utilisé. Les taux de cytokines dans le sang et dans le tissu greffé, nous engagent à réaliser cette thérapie cellulaire à JO et J12 sur ce modèle.

Résumé / Abstract : Vascular rejection after organ transplantation is characterized by an arterial occlusive lesion, resulting from intimal proliferation occurring in response to arterial wall immune aggression. We think that an early endothelial repair may prevent vascular graft rejection. The aim of this work was to compare different pharmacologic endothelial progenitor cell mobilizing treatments for their protective effects against vascular rejection. Aortic transplants were made from balb/c donor to C57B1/6 recipient mice. Three treatments were used: low molecular weight fucoidan (LMWF), simvastatin, and AMD3100. The circulating levels of progenitor cells were found to be increased by all three treatments, as determined by flow cytometry. We found by Morphometric and immunohistochemical analyses, that the three treatments significantly reduced intimal proliferation, compared with nontreated allografts. This was associated with intimal re-endothelialization of the grafts. Further, in chimeric mice that had previously received GFP-transgenic bone marrow transplantation, GFP-positive cells were found in the vascular allograft intima, indicating that re-endothelialization was, at least partly, due to the recruitment of bone marrow-derived, presumably endothelial progenitor circulating cells. Bone marrow derived progenitor cells mobilized by the three treatments may play a direct role in the endothelial repair process and in the suppression of intimal proliferation. In order to use a direct cell therapy, we have to know precised dates for injection of progenitor cells. We mesured kinetic expression of three cytokines (SDF-1, MCP-1, VEGF) implicated in mobilization, homing and differentiation of progenitor cells during vascular aggression. The same model was used. Cytokine rates were measured in blood and in graft tissue by an ELISA technique. The results prompt us to consider cell therapy at DO and D 12 in this mouse model of aortic graft.