Date : 2012
Editeur / Publisher : [s.l.] : [s.n.] , 2012
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Résumé / Abstract : Chez les patients infectés par le virus de l'hépatite C (VHC), l'alcoolisme aggrave la maladie du foie, mais les mécanismes sous-tendant cette comorbidité restent mal compris. Nous avons étudié l'effet de l'éthanol sur l'infection par le VHC dans notre système original d'infection productive en cultures primaires d'hépatocytes humains adultes, et montré que l'éthanol augmentait la production des particules virales les plus infectieuses qui sont liées aux lipoprotéines de très basse densité (VLDL). La combinaison VHC/éthanol induisait un effet synergique sur l'induction de certains gènes cibles de la réponse au stress du réticulum endoplasmique (RE) impliqués dans la restauration de l'homéostasie du RE et la survie cellulaire. L'ensemble de ces données suggèrent que l'éthanol favorise la morphogenèse du VHC en augmentant la fonctionnalité du RE et peut-être en stimulant la lipogenèse, l'une des cibles du stress du RE. La morphogenèse du VHC reste l'étape la moins connue du cycle du VHC. Nous avons recherché des déterminants viraux de ce processus en lignée hépatocytaire en nous intéressant aux tyrosines conservées de la protéine de capside (C). Nous avons identifié la tyrosine en position 136, au sein d'un potentiel motif YXXØ, comme un déterminant essentiel de la morphogenèse des particules infectieuses du VHC au niveau du RE. Nos résultats désignent une fonction encore méconnue de la protéine C dans une étape ultérieure à l'initiation de l'assemblage viral, probablement de bourgeonnement des particules virales en liaison avec l'apolipoprotéine B, un composant clé de la biogenèse des VLDL dans le RE.
Résumé / Abstract : Excessive alcohol consumption by patients infected with hepatitis C virus (HCV) increases the viral load and aggravates the liver disease but the mechanisms underlying this comorbidity remain elusive. Here we took advantage of our unique model of productive HCV infection in primary human adult hepatocytes (PHH) to assess the impact of ethanol. In this relevant model, addition of ethanol increased the production of the most infectious viral particles, which are associated with very-low-density lipoproteins (VLDL). Combination of HCV and ethanol showed additive effects on the expression of genes involved in endoplasmic reticulum (ER) homeostasis recovery and maintenance of cell survival. Collectively, these results suggest that ethanol promotes morphogenesis of infectious HCV by improving EF functionality and maybe lipogenesis, which is one of the ER stress targets. Considering that HCV morphogenesis remains elusive, we searched in parallel for viral determinants involved in this process using the infectious HCV cell culture system based on human-derived hepatoma cell line Huh-7. Because tyrosine-based motifs have been implicated in the late budding of other viruses, we investigated by reverse genetics the role of the four conserved tyrosines of core protein in HCV life cycle. We identified the tyrosine in position 136, within a potential YXXØ motif, as a critical determinant of HCV morphogenesis in the ER. Collectively our results designate a previously unrecognized core protein-dependent step subsequent to the initiation of viral assembly, maybe the viral budding linked to the apolipoprotein B, a key player in VLDL biogenesis in the ER.