Date : 2011
Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 2011
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Résumé / Abstract : Le syndrome de Noonan (SN) est une maladie génétique autosomique dominante relativement fréquente (1/2000 naissances), qui appartient à la famille des syndromes Neuro-Cardio-Facio-Cutanés (NCFC), et qui caractérisée par l'association d'une cardiopathie, d'une dysmorphie faciale et d'un retard de croissance. Dans 50% des cas, le SN est causé par des mutations sur le gène PTPN11, codant la tyrosine phosphatase SHP2. SHP2 joue un rôle essentiel dans le développement et l'homéostasie de multiples tissus et organes par sa capacité à réguler diverses voies de signalisation majeures, telles que les voies Ras/Mitogen-Activated Protein Kinase (MAPK), Phosphoinositide 3-Kinase (PI3K)/Akt et JAK2/STAT5. Si l'on sait que les mutations SN de SHP2 causent son hyperactivation, il reste à comprendre comment cette hyperactivation de SHP2 induit le développement des différents symptômes du SN et notamment le retard statural, dont l'origine reste mal comprise bien qu'il concerne 80% des patients SN. Or, des études cliniques ont révélé que les patients SN présentent des taux normaux d'hormone de croissance (Growth Hormone, GH) associés à des taux faibles d'Insulin-like-Growth-Factor-I (IGF-I), son médiateur biologique, un profil hormonal évocateur d'une résistance à GH. Ces travaux de thèse ont donc eu pour objectifs d'identifier le rôle de SHP2 en aval du récepteur de GH et de déterminer quelles étaient les conséquences physiopathologiques des mutations SN de SHP2 dans la réponse à GH. A l'aide de différents outils moléculaires et cellulaires et d'un modèle murin du SN (souris Ptpn11D61G/+), nous avons montré que SHP2 joue un rôle négatif dans la production d'IGF-I induite par GH, ce qui se traduit par des taux bas d'IGF-I chez des animaux SN en phase de croissance, en association avec un retard statural. D'un point de vue mécanistique, nous avons démontré, par différentes approches, que SHP2 joue un rôle positif dans l'activation de la voie Ras/MAPK induite par GH, sans affecter les autres voies de signalisation activées par le R-GH (JAK/STAT, PI3K/Akt). Nous avons, de plus, disséqué le mode d'action de SHP2 dans l'activation de la voie Ras/MAPK, en montrant que SHP2 joue un rôle positif dans l'activation de Ras en déphosphorylant la protéine adaptatrice Gab1 sur ses sites de recrutement pour un inhibiteur naturel de Ras, RASGAP. Enfin, nous avons pu faire le lien entre ces 2 processus dépendants de SHP2 sous induction par GH, en montrant que l'inhibition des MAPK induisait une augmentation de la production d'IGF-I induite par GH, in vitro et in vivo. De façon importante, cette restauration des taux d'IGF-I chez les souris SN s'accompagne d'une amélioration de leur croissance, suggérant que le ciblage de la voie Ras/MAPK puisse avoir un effet bénéfique sur le retard de croissance des sujets SN. A l'appui de cela, plusieurs études récentes ont montré un effet bénéfique d'un tel traitement sur d'autres traits phénotypiques (cardiopathies, dysmorphie).
Résumé / Abstract : Noonan syndrome (NS) is a common congenital autosomal dominant disorder (estimated incidence 1/2000 live births), that belongs to the family of Neuro-Cardio-Facio-Cutaneous (NCFC) syndromes and is characterized by heart defects, facial dysmorphic features and growth retardation. Nearly half of the NS patients carry a mutation of the PTPN11 gene, encoding the tyrosine phosphatase SHP2, that plays a key role in development and homeostasis of multiple tissues and organs, through its ability to regulate various signaling pathways, including the Ras/Mitogen-Activated Protein Kinase (MAPK), Phosphoinositide 3-Kinase (PI3K)/Akt and JAK2/STAT5 module. It is known that NS-causing mutations induce a hyperactivation of the phosphatase. However, it remains to be established how this hyperactivation is responsible for the development of the different symptoms of the disease. This is notably the case for short stature, which origin is poorly understood although it concerns 80% of NS patients. Clinical studies have revealed that NS patients display normal level of growth hormone (GH) but low level of Insulin-like-Growth-Factor-I (IGF-I), its biological mediator, a hormonal profile that is evocative of GH resistance. This project thus aimed at identifying the role of SHP2 downstream of the GH receptor and at determining the pathophysiological outcomes of SN-causing SHP2 mutations in GH response. Using different molecular and cellular tools as well as a mouse model of NS (Ptpn11D61G/+ mice), we have shown that SHP2 plays a negative role in GH-induced IGF-I production, which results in low IGF-I levels in growing NS animals, in association with short stature. On a mechanistic point of view, we demonstrated through several approaches, that SHP2 plays a positive role in GH-evoked Ras/MAPK activation, without affecting other signaling pathways activated by the GH-R (JAK/STAT, PI3K/Akt). Moreover, we deciphered how SHP2 acts in the Ras/MAPK pathway, showing that it participates in Ras activation by dephosphorylating the adaptor Gab1 on its binding site for RASGAP, a natural inhibitor of Ras. Lastly, we could link these 2 SHP2-dependent processes under GH induction, showing that MAPK inhibition results in an increase in GH-induced IGF-I production in vitro and in vivo. Importantly, restoring IGF-I level in young NS animals results in an improvment of their growth parameters, suggesting that targeting that Ras/MAPK pathway could be beneficial on growth retardation in NS subjects. Supporting this view, recents reports have shown that such strategy could be effective to alleviate other NS features, notably cardiopathy and dysmorphic abnormalities.