Date : 2010
Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 2010
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : anglais / English
Aspergillus fumigatus -- Dissertation universitaire
Interleukine-1 bêta -- métabolisme -- Dissertation universitaire
Inflammation -- Dissertation universitaire
Chlamydia trachomatis -- Dissertation universitaire
Caspase-1 -- Dissertation universitaire
Protéines adaptatrices de la transduction du signal -- Dissertation universitaire
Résumé / Abstract : L'élaboration d'une réponse immunitaire efficace représente un facteur primordial dans la lutte contre les infections ainsi que l'élimination des pathogènes. A la suite d'une infection, l'immunité innée induit une réponse inflammatoire via la sécrétion de cytokines et de chemokines qui ont pour rôle de recruter les cellules immunitaires au site de l'infection assurant l'établissement d'une réponse immunitaire adéquate. Au cours de mon projet de thèse, je me suis focalisée sur l'étude d'un complexe cytoplasmique nommé « inflammasome » qui régule la réponse inflammatoire en activant la protéase caspase-1. Une fois activée, caspase-1 reconnait et coupe son substrat interleukine-lβ (IL-1β) induisant sa sécrétion. Durant l'infection, l'activation des monocytes et des macrophages par les molécules antigéniques microbiennes induit la transcription du gène d'IL-1β ainsi que la synthèse protéique de son précurseur pro-IL-1β ; cependant un second signal est nécessaire afin d'activer caspase-1 qui par la suite transforme pro- IL-lβ en IL-1β. Récemment, plusieurs études ont révélé l'implication des inflammasomes dans la détection des bactéries, virus et champignons et ceci est due à leur capacité de percevoir des signaux spécifiques et caractéristiques des infections dangereuses. L'activation d'un inflammasome au cours de l'infection par le champignon Aspergillus fumigatus et la bactérie Chlamydia trachomatis n'a jamais été étudiée. Par conséquence, j'ai examiné si ces deux pathogènes sont aptes à induire l'assemblage d'un inflammasome dans la lignée monocytaire humaine (THP-1) et j'ai recherché les signaux responsables de cette activation. Les résultats montrent que A. fumigatus et C. trachomatis activent un inflammasome composé du récepteur « Nod-Like-Receptor 3 »(NALP3) et que ceci nécessite la présence de l'adaptateur ASC qui a comme rôle de recruter la caspase-1 au sein du complexe protéique. De plus, en utilisant plusieurs inhibiteurs et en réduisant l'expression de différents gènes par RNA interférence, j'ai pu montrer que le stress oxydatif (ROS), l'efflux potassique ainsi que la tyrosine kinase Syk représentent des éléments cruciaux dans l'activation de Pinflammasome NALP3. En conclusion, au cours de ma thèse, j ai pu montrer pour la première fois l'implication d'un inflammasome durant l'infection par A. fumigatus et C. trachomatis en soulignant comment deux différents pathogènes présentant des caractéristiques antigéniques ainsi que des modes d'infection différentes puissent provoquer des modifications communes au sein de l'hôte qui convergent vers un activation d'une voie identique qui régit l'établissement d'une réponse inflammatoire efficace.
Résumé / Abstract : The elaboration of an effective immune response is a key factor in fighting against invading pathogenic microbes and eliminating them. Upon microbial sensing, the innate immune System initiate the inflammatory response by secreting cytokines and chemokines responsible for recruiting immune cells to the site of infection and inducing the establishment of adaptive immunity. During my thesis, I focused my studies on a cytoplamic protein complex called "inflammasome" which had been found to regulate the inflammation process by activating the cystein protease, caspase-1 which has as a substrate the potent pro-inflammatory cytokine IL-1β. During infection, monocytes and macrophages challenged with different microbial molecules get activated and induce the expression and the synthesis of pro- IL-lp waiting for a second signal called Danger signal essential for pro-IL-lβ cleavage by caspase-1 and its secretion. Growing number of studies reveal the importance of inflammasomes assembly during several bacterial, viruses and fungal infections as they sense different signals characteristic of a pathogenic infection. The activation of an inflammasome during the fungus Aspergillus fumigatus and the bacteria Chlamydia trachomatis infection have never been investigated so far. Therefore I investigated whether thèse two pathogens are able to induce inflammasome assembly in a human monocyte cell line and identified the molecules and the signals triggering this activation. The results demonstrated that both Aspergillus fumigatus and Chlamydia trachomatis induce the activation of an inflammasome in which the Nod Like Receptor 3 (NALP3) is involved requiring the presence of the adaptor ASC that bridges NALP3 to caspase-1. Additionally, I proved using Knocked down cells and different inhibitors that Reactive oxygen species, potassium efflux as well as the activation of the spleen tyrosine kinase (Syk) are required for this activation. As a conclusion, we showed for the first time the activation of NALP3 inflammasome during infection with both pathogens, highlighted how different microbes presenting distinct antigenic molecules, exhibiting different infectious strategies are capable of inducing common intracellular modifications that converge to the activation of the same inflammasome.