Date : 2010
Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 2010
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Maladie de Crohn -- génétique -- Dissertation universitaire
Protéine adaptatrice de signalisation NOD2 -- Dissertation universitaire
Analyse de mutations d'ADN -- Dissertation universitaire
Prédisposition génétique à une maladie -- Dissertation universitaire
Résumé / Abstract : CARD15/NOD2, le plus étudié des gènes de susceptibilités à la maladie de Crohn, appartient à la famille des gènes de l'immunité innée. L'objectif de cette thèse était d'étudier des gènes partenaires physiques de NOD2 afin d'identifier de nouveau gènes de susceptibilité à la maladie de Crohn et de mieux comprendre la voie de signalisation de NOD2. 22 protéines se liant à NOD2 ont été identifiées au laboratoire par la technique du double hybride. L'étude d'association des gènes de ces 22 protéines avec la maladie de Crohn a permis d'identifier 1 facteur de transcription associé à la maladie de Crohn: HIVEPl. Le projet de thèse s'est porté vers la caractérisation génétique et fonctionnelle de HIVEPl. Les individus mutés pour HIVEPl montrent un phénotype similaire à celui des patients mutés pour NOD2. Sur une lignée monocytaire, il a été montré une co-régulation de HIVEPl et de NOD2 après activation des voies de l'immunité innée par le LPS, le MDP ou encore le PAM3CSK4. Dans cette lignée, il a également été montré que le complexe formé par NOD2 et HIVEPl se défait en présence de MDP ou de LPS, et qu'il y a translocation du facteur de transcription dans le noyau après stimulation par le LPS. Chez les patients, HIVEPl est exprimé dans les macrophages du colon et de l'iléon, que la zone soit saine ou inflammatoire, ce qui n'est pas observé chez le sujet sain. Ces travaux montrent l'importance de ce gène dans la pathologie et suggère une étude plus approfondie.
Résumé / Abstract : CARD15/NOD2 is a Crohn's disease sucseptibility gene and its protein is particularly studied. The goal of this work was to study and identify interacting protein in a genetic and in a functional point of view to better understand the NOD2 pathway. In the laboratory, 22 new NOD2 interacting proteins were identified with yeast two hybrid techniques. The genetic studies of the 22 genes identified one new candidate gene associated with Crohn's disease, a transcription factor named HIVEPl. We then characterised these gene and protein. The correlation genotype-phenotype show that patients mutated for HIVEPl show the same phenotype that patients mutated for NOD2. On a monocytic cell line, we show that there is a co-regulation between NOD2 and HIVEPl after activation of innate immune pathway with MDP, LPS and PAM3CSK4. The proteic complex formed by HIVEPl and NOD2 was present at the basal level in this cell line and disrupted after activation by MDP or LPS. After activation with LPS, HIVEPl translocate into the nucleus. We further studied HIVEPl in colon and ileal patients' biopsies and specimens and we observed that HIVEPl is expressed in macrophage in intestine whereas this is not the case in healthy control. This study shows that HIVEPl is important in Crohn's disease and need further investigation.