Date : 2007
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Aeromonas hydrophila -- Résistance aux antibiotiques
Résistance multiple aux médicaments
Bactéries Gram négatives -- Résistance aux antibiotiques
Résumé / Abstract : Au cours de la dernière décennie, Aeromonas hydrophila s'est révélée être un pathogène opportuniste chez l'homme. Chez les bactéries à Gram négatif, les systèmes d'efflux contribuent de manière importante aux résistances multidrogues. Ce travail rapporte pour la première fois une analyse fonctionnelle d'un système d'efflux multidrug resistant (MDR) de type resistance-nodulation-cell division (RND) chez le genre Aeromonas. L'implication du système d'efflux AheABC dans la résistance intrinsèque MDR à 13 substrats antibiotiques et autres a été montrée par des expériences d'inactivation/complémentation chez la souche ATCC 7966T d'Aeromonas hydrophila. Possédant un spectre plus étroit que son homologue AcrAB d'E. coli, ce système n'efflue pas les quinolones et fluoroquinolones. La protéine AheR interagit avec la séquence promotrice d'aheABC et serait impliquée dans la régulation spécifique. De plus, un motif "marbox" présent dans cette région promotrice et un homologue de l'activateur global Rob d'E. coli ont été identifiés suggérant aussi un niveau de régulation global. Par ailleurs, la présence d'autre(s) pompe(s) d'efflux chez cette espèce a été confirmée par l'utilisation du PAβN (Phe-Arg-β-naphtilamide), inhibiteur de pompes RND. L'analyse de l'activité du PAβN sur 10 souches d'Aeromonas provenant de l'environnement ou d'origine clinique montre un rôle du système AheABC et d'autres pompes d'efflux dans la résistance de ces souches. La résistance aux quinolones et fluoroquinolones pour certaines de ces souches associe l'efflux actif à d'autres mécanismes de résistances comme des mutations dans la Quinolone Resistance Determining Region des gènes gyrA et parC.
Résumé / Abstract : During the last decade, Aeromonas hydrophila has been shown to be an opportunistic pathogen. In Gram-negative bacteria, the efflux pumps play a major role in the development of the multi-drug resistance phenotype (MDR). This work demonstrated for the first time the funtional analysis of an efflux system of the resistance-nodulation-cell division (RND) type in the genus Aeromonas Inactivation and complementation experiments have shown that AheABC efflux mechanism is responsible for the intrinsic resistance to 13 antimicrobials in the 7966T reference strain. It is noteworthy that the system has nevertheless a narrower spectrum than its homologous in E. coli as it doesn't include the quinolones antibiotics. The AheR protein interacts with the promoter sequence of the AheABC operon and would be involved in the specific regulation. Furthermore, the finding of a "marbox" motif in this region and an E. coli Rb-like global activator together implies a global regulation. In addition, the presence of other various pumps in this species has been confirmed by the use of PAβN (Phe-Arg-βnaphthilamide) which is an inhibitor of efflux pumps. Analysis of the activity of PABN on 10 Aeromonas strains from environmental and clinical sources has shown that the AheABC syqtem and other pumps play an important role in the resistance phenotype exhibited by these strains. Regarding the genetic basis of the mechanisms of resistance to quinolones in these strains we have shown that in addition to efflux pumps activity, mutations in the quinolone resistance determining region (QRDR) are also involved in the overall resistant phenotype.