Développement de nouveaux outils pour l'analyse protéomique quantitative et la phosphoprotéomique : application à l'étude de sécrétomes gliaux et de voies de signalisation impliquées dans la survie neuronale / Nicolas Delcourt ; [sous la direction de] Joël Bockaert

Résumé / Abstract : Au cours de ma thèse, j'ai développé dans un premier temps une nouvelle méthode pour la quantification des variations d'expression des protéines par spectrométrie de masse MALDITOF, que j'ai ensuite appliquée à l'étude des modifications des sécrétions protéiques de cultures primaires d'astrocytes en réponse à un traitement pro-inflammatoire. Dans un deuxième temps, j'ai développé un programme visant à décrire le phosphoprotéome des neurones corticaux traités par deux neurotrophines, l'insulin-like growth factor 1 (IGF-1) et le pituitary adenylyl cyclase activating polypeptide (PACAP). J'ai utilisé une approche phosphoprotéomique basée sur l'enrichissement des phosphoprotéines par chromatographie métal-phosphate suivi de la purification des phosphopeptides par chromatographie de dioxyde de titanium. J'ai ainsi démontré qu'un traitement de neurones corticaux à l'IGF-1, qui active un récepteur à activité tyrosine kinase (RTK) induisait la transactivation d'un récepteur couplé aux protéines G (RCPG), le récepteur PAC1 du PACAP. Enfin, grâce à l'utilisation de souris dépourvues du récepteur PAC1, j'ai montré que la transactivation du récepteur PAC1 jouait un rôle essentiel dans l'inhibition de l'apoptose neuronale par l'IGF-1.