CARACTERISATION FONCTIONNELLE DE DEUX MOTIFS PEPTIDIQUES CONSERVES CHEZ LES METHIONYL-ARNT SYNTHETASES PROCARYOTES / EMMANUELLE SCHMITT ; SOUS LA DIRECTION DE SYLVAIN BLANQUET

Date :

Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 1994

Format : 203 P.

Type : Livre / Book

Type : Thèse / Thesis

Langue / Language : français / French

Ligases

ARN de transfert

Blanquet, Sylvain (1945-.... ; biologiste) (Directeur de thèse / thesis advisor)

École polytechnique (Palaiseau, Essonne ; 1795-....) (Organisme de soutenance / degree-grantor)

Résumé / Abstract : L'UTILISATION DE LA MUTAGENESE DIRIGEE ET LA CARACTERISATION BIOCHIMIQUE DE VARIANTS DU MOTIF KMSKS DE LA METRS D'E. COLI A PERMIS DE DEMONTRER LA PARTICIPATION DE CHACUN DES RESIDUS DEFINISSANT CETTE SEQUENCE A LA STABILISATION DE L'ETAT DE TRANSITION CONDUISANT A LA FORMATION DU METHIONYL ADENYLATE. DE PLUS, NOUS MONTRONS QU'UN TEL ROLE DANS LA CATALYSE N'EST POSSIBLE QUE GRACE A UN MOUVEMENT DE LA BOUCLE KMSKS AU COURS DE LA REACTION. LA RECONNAISSANCE SPECIFIQUE DE L'ANTICODON METHIONINE A ETE ABORDEE PAR UNE APPROCHE PERMETTANT D'ISOLER DES METRS MODIFIEES SPECIFIQUEMENT DANS LA REGION 460, ET DEVENUES CAPABLES D'AMINOACYLER IN VIVO UN ARNT#M#E#T PORTANT UN ANTICODON NON METHIONINE. CETTE ETUDE A REVELE L'IMPORTANCE DE DEUX RESIDUS ASPARTATE (456 ET 449) ET DU RESIDU ASN 452. LA CARACTERISATION BIOCHIMIQUE DE VARIANTS PONCTUELS DE CES POSITIONS A PERMIS D'ABOUTIR A DEUX CONCLUSIONS ESSENTIELLES: 1) LE RESIDU ASN 452 EST INDISPENSABLE A LA RECONNAISSANCE DE L'ANTICODON METHIONINE. SON ROLE SE SITUE DANS LA STABILISATION DU COMPLEXE E:ARNT; 2) LA PRESENCE DES RESIDUS ASPARTATE EN POSITION 449 OU 456 EST INDISPENSABLE POUR ASSURER LE REJET DES ANTICODONS NON METHIONINE. CES DEUX RESIDUS NE SONT TOUTEFOIS PAS NECESSAIRES A L'AMINOACYLATION DE L'ARNT#F#M#E#T SAUVAGE. AINSI, LA RECONNAISSANCE DE L'ANTICODON METHIONINE AU NIVEAU DE LA REGION 460 MET EN UVRE DES DETERMINANTS POSITIFS (TRP 461, ASN 452) MAIS EGALEMENT DES DETERMINANTS NEGATIFS (ASP 449 ET 456) NECESSAIRES A L'EXCLUSION DES MAUVAIS SUBSTRATS