Date : 1993
Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 1993
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Levure (agent de fermentation)
Classification Dewey : 574.8
Résumé / Abstract : L'excision-epissage est l'un des processus fondamentaux intervenant lors de la maturation des arns pré messagers nucléaires en arns messagers. Il a lieu au sein d'un complexe multi moléculaire, le spliceosome, constitué de protéines et de particules ribonucléoprotéiques, les particules snrnps. Les petits arns contenus dans les particules snrnps sont appelés snrnas, et sont au nombre de cinq: u1, u2 et u5, qui sont présents au sein de particules individuelles ; u4 et u6 qui sont présents au sein d'une même particule, la snrnp u4/u6. Chez la levure saccharomyces cerevisiae, des mutants conditionnels affectés dans la réalisation de ce processus ont été identifiés. Les mutants prp6-1 et prp9-1 sont déficients in vivo dans le processus d'epissage et présentent un export des arns pré messagers vers le cytoplasme. Dans le but de préciser les rôles des protéines prp6 et prp9 dans le processus d'excision-epissage, nous avons développé des approches immunologiques et biochimiques: des anticorps polyclonaux réagissant spécifiquement avec chacune des deux protéines ont été obtenus, et l'utilisation de ces anticorps a été combinée avec l'analyse de réactions d'epissage in vitro et avec la caractérisation des particules snrnps. Nous avons montré que la protéine prp6 est spécifiquement associée à la tri-snrnp u4/u6.u5 et nécessaire à son accumulation. Elle n'est pas constitutive, ni de la particule u4/u6, ni de la particule u5. prp6 est la seule protéine de levure décrite, qui soit exclusivement associée à la tri-snrnp u4/u6.u5. La protéine prp9 est nécessaire à l'étape d'addition de la snrnp u2 sur l'arn pré messager lors de la mise en place du spliceosome in vitro. Cependant, elle n'est que faiblement associée à la particule snrnp u2. L'utilisation des anticorps a également permis de montrer qu'il existait dans les cellules héla un homologue structural et fonctionnel de la protéine prp9