Date : 1997
Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 1997
Format : 206 P.
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Résumé / Abstract : CE TRAVAIL ILLUSTRE L'UTILISATION DE METHODES COMBINEES DE SPECTROMETRIE DE MASSE DANS LA CARACTERISATION DE MUTANTS D'HEMOGLOBINE HUMAINE ET LA DETERMINATION D'UN SITE DE PHOSPHORYLATION SUR LA PROTEINE FIXJD54N. DANS UNE PREMIERE PARTIE, DIFFERENTS VARIANTS D'HEMOGLOBINE HUMAINE ONT ETE ANALYSES. LES VARIATIONS DE MASSE DUES AUX MUTATIONS SONT CARACTERISEES PAR ELECTROSPRAY. APRES DIGESTION ENZYMATIQUE DE LA CHAINE MUTEE ET SEPARATION CHROMATOGRAPHIQUE DES PEPTIDES, LE PEPTIDE MUTE EST ANALYSE PAR SPECTROMETRIE DE MASSE LSIMS ET ELECTROSPRAY AFIN DE DETERMINER SA MASSE MOLECULAIRE ET SON ETAT DE CHARGE. AFIN DE LOCALISER AVEC PRECISION LE SITE DE LA MUTATION, LE PEPTIDE EST SEQUENCE SOIT PAR SPECTROMETRIE DE MASSE EN TANDEM SOIT PAR DIGESTION ENZYMATIQUE RECURRENTE AU MOYEN DE CARBOXYPEPTIDASES COUPLEE A UNE ANALYSE MALDI-TOF. CINQ NOUVEAUX VARIANTS D'HEMOGLOBINES ONT ETE IDENTIFIES, ISSUS D'UNE MUTATION PONCTUELLE (HB ALZETTE, HB VILLEURBANNE ET HB LES ANDELYS), D'UNE DOUBLE MUTATION (HB VILLEPARISIS) OU D'UNE DELETION DE SEQUENCE (HB J BISKRA). LA DEUXIEME PARTIE EST CONSACREE A LA CARACTERISATION DU SITE SECONDAIRE DE PHOSPHORYLATION SECONDAIRE DE LA PROTEINE FIXJD54N, MUTANT DE LA PROTEINE FIXJ QUI JOUE LE ROLE DE REGULATEUR DANS LE SYSTEME DE TRANSDUCTION DU SIGNAL A DEUX COMPOSANTS FIXL/FIXJ CHEZ RHIZOBIUM MELILOTI. NOUS AVONS MONTRE PAR DIFFERENTES TECHNIQUES DE SPECTROMETRIE DE MASSE (ELECTROSPRAY, MALDI, COUPLAGE LC/MS) QUE CE SITE DE PHOSPHORYLATION EST UNE THREONINE ADJACENTE A L'ACIDE ASPARTIQUE 54 SITE DE LA PHOSPHORYLATION PRINCIPALE.