Date : 1997
Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 1997
Format : 159 P.
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Résumé / Abstract : LA METHYLATION DE L'ADN GENOMIQUE INTERVIENT DANS UN GRAND NOMBRE DE PROCESSUS BIOLOGIQUES INCLUANT LA REGULATION DES GENES, LA DETERMINATION DE LA STRUCTURE DE LA CHROMATINE, L'EMPREINTE ALLELIQUE, L'AUGMENTATION DU TAUX DE MUTATION SPONTANEE, LES PHENOMENES EPIGENETIQUES ET PROBABLEMENT AUSSI LES REACTIONS DE DEFENSE. LA METHYLATION AFFECTE 3 A 8% DES CYTOSINES CHEZ LES MAMMIFERES ET JUSQU'A 37% DES CYTOSINES CHEZ LES PLANTES. UNE MODIFICATION DE CE PROFIL DE METHYLATION PEUT ENTRAINER UN DEVELOPPEMENT ANORMAL DES ORGANISMES. NOUS AVONS AUGMENTE LA SENSIBILITE DE L'ANALYSE DE LA METHYLATION DES CYTOSINES PAR LA METHODE AU BISULFITE DE SODIUM EN MODIFIANT LES CONDITIONS DE REACTION. L'ANALYSE DE LA METHYLATION GENOMIQUE TOTALE AUX SITES CG PAR LE TEST DE SATURATION DES CYTOSINES A LA SSSL METHYLASE A ETE DEVELOPPEE ET OPTIMISEE POUR SON UTILISATION DANS L'ETUDE DU GENOME DE TABAC. DES PLANTES DE TABAC TRANSFORMEES AVEC L'ADNC DU GENE DE LA METHYLASE DE SOURIS EN ORIENTATION ANTISENS MONTRENT UNE PLUS GRANDE FACILITE DE REGENERATION PAR RAPPORT AUX CONTROLES GUS. UNE ABSENCE DE REGENERATION EST OBSERVEE POUR LES TRANSFORMATIONS AVEC L'ADNC DE LA METHYLASE EN ORIENTATION SENS. L'ADN DE TOUS CES TRANSFORMANTS PRIMAIRES EST HYPERMETHYLE. L'HYPERMETHYLATION OBSERVEE EST DUE A LA PRESENCE D'ANTIBIOTIQUES DANS LE MILIEU DE CULTURE. LA KANAMYCINE, L'HYGROMYCINE ET LA CEFOTAXIME INDUISENT UNE HYPERMETHYLATION GENOMIQUE EN FONCTION DE LA DOSE UTILISEE ET DE LA DUREE D'APPLICATION. L'HYPERMETHYLATION AFFECTE LE GENOME ENTIER ET N'EST PAS REVERSIBLE. POUR TESTER L'INTERVENTION DE LA METHYLATION DANS LES REACTIONS DE DEFENSE, NOUS AVONS INFECTE DU TABAC AVEC PSEUDOMONAS SYRINGAE. AUCUN CHANGEMENT DE LA METHYLATION GENOMIQUE N'A PU ETRE ASSOCIE A CETTE REACTION DE DEFENSE DES PLANTES. LORS DE LA CULTURE DE COUCHES MINCES D'EPIDERME DE TABAC, NOUS AVONS MIS EN EVIDENCE UN EFFET D'INHIBITION DE LA NEOFORMATION DES MERISTEMES INDUIT PAR LES ANTIBIOTIQUES.