ETUDE DE L'INTERACTION ANNEXINE II-MEMBRANES : COMPARTIMENTAGE, MIGRATION, AGREGATION ET FUSION / ISABELLE SAGOT ; SOUS LA DIRECTION DE LOUISE-ANNE PRADEL

Date :

Editeur / Publisher : [S.l.] : [s.n.] , 1996

Format : 165 P.

Type : Livre / Book

Type : Thèse / Thesis

Langue / Language : français / French

Pradel, Louise-Anne (Directeur de thèse / thesis advisor)

Université Pierre et Marie Curie (Paris ; 1971-2017) (Organisme de soutenance / degree-grantor)

Relation : ETUDE DE L'INTERACTION ANNEXINE II-MEMBRANES : COMPARTIMENTAGE, MIGRATION, AGREGATION ET FUSION / Isabelle Sagot ; sous la direction de Louise-Anne Pradel / Grenoble : Atelier national de reproduction des thèses , 1996

Résumé / Abstract : L'ANNEXINE II APPARTIENT A LA FAMILLE DES ANNEXINES, PROTEINES FIXANT LE CALCIUM ET LES PHOSPHOLIPIDES ANIONIQUES. IN VIVO, L'ANNEXINE II EXISTE SOUS UNE FORME MONOMERIQUE DE 36 KDA, ET, SOUS UNE FORME HETEROTETRAMERIQUE DE 90 KDA CONSTITUEE DE DEUX CHAINES LOURDES DE 36 KDA ET DEUX CHAINES LEGERES DE 11 KDA. NOUS AVONS ETUDIE LES DEUX FORMES D'ANNEXINE II DANS LES CELLULES CHROMAFFINES, AU REPOS OU STIMULEES PAR LA NICOTINE, ET DETERMINE LEUR LOCALISATION DANS LES DIFFERENTS COMPARTIMENTS CELLULAIRES. DANS LES CELLULES AU REPOS, L'ANNEXINE II EST MAJORITAIREMENT CYTOSOLIQUE ET MONOMERIQUE TANDIS QUE LA PROTEINE DE 11 KDA EST LOCALISEE A LA FOIS DANS UN COMPARTIMENT MEMBRANAIRE SPECIFIQUE (OCTYL GLUCOSIDE SOLUBLE, OGS) ET DANS UN COMPARTIMENT CYTOSQUELETTIQUE (OCTYL GLUCOSIDE INSOLUBLE, OGI). APRES STIMULATION PAR LA NICOTINE, L'ANNEXINE II (P36) SE DEPLACE VERS LES COMPARTIMENTS OGS ET OGI. DANS LE COMPARTIMENT MEMBRANAIRE SPECIFIQUE, LA PROTEINE P36 DEMEURE SOUS UNE FORME MONOMERIQUE ALORS QUE DANS LE COMPARTIMENT CYTOSQUELETTIQUE, ELLE FORME PROBABLEMENT UN COMPLEXE AVEC P11. NOUS SAVONS QUE P90 AGREGE LES GRANULES CHROMAFFINES A UNE CONCENTRATION PHYSIOLOGIQUE DE CALCIUM. LA PROTEINE P90 PHOSPHORYLEE PAR LA PROTEINE KINASE C (PKC) N'AGREGE PLUS, IN VITRO, LES GRANULES CHROMAFFINES. NOUS AVONS MONTRE QUE SUR DES GRANULES CHROMAFFINES PREALABLEMENT AGREGES PAR P90, LA PHOSPHORYLATION PAR LA PKC, ENTRAINAIT LA FUSION DE CES GRANULES. POUR CONFIRMER LE CARACTERE FUSOGENE DE L'ANNEXINE II PHOSPHORYLEE, NOUS UTILISONS UN MODELE ARTIFICIEL: LES LIPOSOMES, DES LIPOSOMES UNILAMELLAIRES FLUORESCENTS (LUV) ET DES LIPOSOMES GEANTS (GUV). NOUS FIXONS LES LUVS FLUORESCENTS SUR LES GUVS EN PRESENCE DE P90, ET APRES ADDITION DE PKC, LA FLUORESCENCE SE DILUE DANS LES LIPIDES DU LIPOSOME GEANT, TRADUISANT UNE FUSION ENTRE LES LIPOSOMES. L'ANNEXINE II HETEROTETRAMERIQUE SEMBLERAIT DONC FUSOGENE SOUS SA FORME PHOSPHORYLEE