Date : 1987
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Résumé / Abstract : Nous avons développé, au laboratoire, l'étude générale des activités enzymatiques qui participent à la phase cytoplasmique du processus de biosynthèse du peptidoglycane chez Escherichia coli. Cette étude ayant pour but principal de mieux cerner les mécanismes de régulation qui contrôlent la biosynthèse de cette macromolécule, nous l'avons orientée suivant deux directions principales :- la première a trait aux caractéristiques biochimiques de ces différents enzymes in vitro : mise au point des essais, recherche d'effecteurs de ces activités, détermination des paramètres cinétiques.- la deuxième approche vise à mieux définir les conditions réelles de fonctionnement de ces activités enzymatiques dans la cellule bactérienne. Cet aspect de notre travail a supposé la détermination des concentrations intracellulaires des substrats, produits et éventuels effecteurs de ces enzymes, nécessitant en particulier la mise au point de nouvelles techniques d'analyse de ces composés. La connaissance de ces concentrations nous a alors permis de préciser le niveau de fonctionnement réel de ces synthétases in vivo et de pouvoir recréer, in vitro, des conditions d'étude de ces enzymes se rapprochant le plus possible de ce qu'elles sont réellement dans la cellule bactérienne. Nous avons alors étudié de façon générale comment varient les différents paramètres de ce système de biosynthèse (teneur cellulaire en peptidoglycane, activités spécifiques des synthétases, concentrations intra-cellulaires de leurs précurseurs) avec les conditions de croissance bactérienne ou lors de perturbations diverses (action d'antibiotiques) affectant cette voie métabolique. L'ensemble des données obtenues à partir de ces expériences, réalisées soit in vitro, soit sur des cellules en croissance, nous apporte alors de nombreuses informations sur les mécanismes de régulation qui contrôlent le flux de précurseurs dans cette séquence réactionnelle.