Date : 1997
Type : Livre / Book
Type : Thèse / ThesisLangue / Language : français / French
Résumé / Abstract : De nombreux transporteurs de molécules anioniques et cationiques sont exprimés au niveau de la membrane sinusoïdale ou canaliculaire de l'hépatocyte, mais la régulation de leur expression et leur activité restent encore mal connues. Au cours de ce travail, nous avons étudié l'expression, la régulation et l'activité de deux transporteurs de molécules cationiques des cellules hépatiques, la P-glycoprotéine (P-gp) qui est située au niveau de la membrane canaliculaire et qui confère le phénotype de résistance aux drogues anticancéreuses (MDR) et le transporteur de cations organiques (OCT1) localisé au niveau de la membrane sinusoïdale. Nous avons montré que les carcinogènes tels que le 2-acétylaminofluorène (2-AAF) et le 3- méthylcholanthrène (MC) ainsi que des drogues anticancéreuses telles que la doxorubicine, augmentent l'expression de la P-gp conférant le phénotype MDR par une augmentation de l'expression des ARNm mdrl dans des modèles cellulaires hépatiques de rat. En revanche, le 2-AAF n'altère pas l'expression des gènes MDR dans les hépatocytes humains en culture. De plus, une augmentation de l'expression de la P-gp est retrouvée après un traitement aigu par le MC et la doxorubicine, à la fois dans les hépatocytes et dans les cellules non parenchymateuses de foie de rat. L'ensemble de ces résultats montre que la régulation de l'expression de la P-gp par des xénobiotiques varie selon les espèces ; elle dépend du gène mdrl également impliqué dans la régénération cellulaire, l'hépatocarcinogénèse et la cholestase, et concerne, au moins chez le rat, les cellules parenchymateuses et non parenchymateuses. Nous avons également décrit deux nouveaux agents modulateurs, le RU486 et la rifampicine qui sont capables de reverser le phénotype de résistance aux drogues anticancéreuses (MDR). Ces molécules augmentent la concentration intracellulaire des drogues anticancéreuses dans les cellules humaines et de rat exprimant la P-gp et, semblent interagir avec cette protéine pour inhiber son fonctionnement. Enfin, nous nous sommes intéressés à l'OCT I, responsable de l'entrée de molécules cationiques dans l'hépatocyte au niveau du pôle sinusoïdal. Les ARNm de l'OCT I sont exprimés dans le foie normal de rat et leur niveau d'expression n'est pas altéré au cours de l'hépatocarcinogénèse expérimentale, alors qu'il est variable dans des cellules d'hépatomes de rat en culture, en relation avec l'état de différenciation cellulaire. Par ailleurs, nous avons décidé de réaliser des études sur l'OCT1 chez l'homme et, nous avons pu obtenir deux séquences de l'ADNc correspondant à l'OCT I humain par criblage d'une banque de foie humain et par extension en 5'. Au total, ces différentes études ont apporté de nouvelles informations sur la régulation de l'expression et l'activité de deux transporteurs de molécules cationiques dans les cellules hépatiques normales et tumorales chez l'homme et chez le rat.